目的 以靶向HER2的人源化单克隆抗体H1-2 scFv为基础构建第三代嵌合抗原受体(CAR),并探讨CAR修饰的T淋巴细胞(CAR-T)对HER2高表达肿瘤的杀伤作用.方法 运用分子克隆方法将CAR的表达框和H1-2 scFv装入慢病毒表达载体,利用慢病毒载体将H1-2 CAR基因转导至T淋巴细胞构建CAR-T细胞,通过酶联免疫吸附测定检测细胞因子白细胞介素2的表达,通过LDH释放实验检测CAR-T细胞杀伤肿瘤细胞的效率.最后用NOD/SCID小鼠移植瘤模型来检测CAR-T细胞在体内杀伤肿瘤细胞的能力.结果 成功构建了靶向HER2的第三代嵌合抗原受体H1-2 CAR表达载体,该载体转染的H1-2 CAR-T细胞能与HER2+的肿瘤细胞结合并提高了细胞因子白细胞介素2的释放.在本研究中H1-2 CAR-T细胞与HER2高表达的肿瘤细胞相互作用时白细胞介素2分泌量可达到1000μg/L以上,而外周血单个核细胞与肿瘤细胞相互作用时基本上不分泌白细胞介素2.在体外肿瘤细胞培养体系中,H1-2 CAR-T细胞对HER2高表达肿瘤细胞的杀伤率明显高于HER2低/不表达的细胞.当效靶比为20:1时,H1-2 CAR-T细胞对HER2高表达的乳腺癌细胞SK-BR-3的杀伤率可以达到(90.1±2.8)
作者：唐海军；刘玉琴；卞晓翠；冯海凉；顾蓓；孙昊；左春霞；周芳颖；刘兢
来源：中华病理学杂志 2017 年 46卷 10期
