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目的 探讨异质性细胞核核糖蛋白(HNRNP)A2B1在小鼠小脑发育及髓母细胞瘤中的表达模式及意义.方法 从数据库查询小鼠小脑及人脑中基因的RNA水平.免疫印迹实验与免疫组织化学实验检测不同年龄C57BL/6野生型小鼠小脑中HNRNPA2B1的蛋白水平.通过免疫组织化学实验检测对照人小脑样本与人髓母细胞瘤中HNRNPA2B1的蛋白水平.m6A?IP?qPCR检测Daoy细胞中HNRNPA2B1 RNA m6A甲基化水平;利用人髓母细胞瘤Daoy细胞检测蛋白酶抑制剂MG132对HNRNPA2B1蛋白丰度的影响.结果 小鼠小脑发育期HNRNPA2B1的RNA及总体蛋白水平高于成年小鼠小脑;原位水平上HNRNPA2B1低表达于含有增殖细胞的外颗粒层,而在浦肯野细胞与分子层细胞中高表达.HNRNPA2B1在髓母细胞瘤中的RNA水平显著高于正常人小脑,但免疫组织化学染色阳性强度明显降低,且差异具有统计学意义(P<0.05).人髓母细胞瘤及Daoy细胞中HNRNPA2B1 RNA上含有m6A修饰;10 μmol/L或20 μmol/L的MG132处理均可引起Daoy细胞中HNRNPA2B1蛋白水平升高.结论 HNRNPA2B1在小鼠小脑发育过程中的表达呈动态变化;与对照组相比,人髓母细胞瘤中HNRNPA2B1的RNA水平显著上升,而蛋白水平明显降低,提示HNRNPA2B1可能与小脑发育及髓母细胞瘤进程相关.HNRNPA2B1 RNA m6A修饰及蛋白的泛素化修饰可能是导致

作者:赵顺莉;赵赋;李晴;张晶;张至玮;李春德;刘丕楠;佟伟民;牛亚梅

来源:中华病理学杂志 2019 年 48卷 9期

知识库介绍

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赵顺莉;赵赋;李晴;张晶;张至玮;李春德;刘丕楠;佟伟民;牛亚梅
来源:
中华病理学杂志 2019 年 48卷 9期
标签:
髓母细胞瘤 核糖核蛋白类 小脑皮质 动物替代试验 小鼠,近交C57BL Medulloblastoma Ribonucleoproteins Cerebellar cortex Animal testing alternatives Mice,Inbred C57BL
目的 探讨异质性细胞核核糖蛋白(HNRNP)A2B1在小鼠小脑发育及髓母细胞瘤中的表达模式及意义.方法 从数据库查询小鼠小脑及人脑中基因的RNA水平.免疫印迹实验与免疫组织化学实验检测不同年龄C57BL/6野生型小鼠小脑中HNRNPA2B1的蛋白水平.通过免疫组织化学实验检测对照人小脑样本与人髓母细胞瘤中HNRNPA2B1的蛋白水平.m6A?IP?qPCR检测Daoy细胞中HNRNPA2B1 RNA m6A甲基化水平;利用人髓母细胞瘤Daoy细胞检测蛋白酶抑制剂MG132对HNRNPA2B1蛋白丰度的影响.结果 小鼠小脑发育期HNRNPA2B1的RNA及总体蛋白水平高于成年小鼠小脑;原位水平上HNRNPA2B1低表达于含有增殖细胞的外颗粒层,而在浦肯野细胞与分子层细胞中高表达.HNRNPA2B1在髓母细胞瘤中的RNA水平显著高于正常人小脑,但免疫组织化学染色阳性强度明显降低,且差异具有统计学意义(P<0.05).人髓母细胞瘤及Daoy细胞中HNRNPA2B1 RNA上含有m6A修饰;10 μmol/L或20 μmol/L的MG132处理均可引起Daoy细胞中HNRNPA2B1蛋白水平升高.结论 HNRNPA2B1在小鼠小脑发育过程中的表达呈动态变化;与对照组相比,人髓母细胞瘤中HNRNPA2B1的RNA水平显著上升,而蛋白水平明显降低,提示HNRNPA2B1可能与小脑发育及髓母细胞瘤进程相关.HNRNPA2B1 RNA m6A修饰及蛋白的泛素化修饰可能是导致