目的从噬菌体表面显示肽库筛选并鉴定日本血吸虫特异性IgE抗体相关表位.方法用ABC-酶联免疫吸附(ELISA)法检测日本血吸虫病流行区居民血清150份,选择其中15份具高滴度血吸虫特异性IgE抗体的血清,混合后经蛋白G柱亲和层析祛除IgG抗体,用于对12肽的噬菌体表面显示肽库进行5轮免疫亲和淘筛.从所获噬菌体克隆中挑取35个克隆,经DNA序列测定,对各独立肽表位进行免疫学鉴定.结果经5轮筛选,DNA序列测定显示共有4个独立噬菌体克隆,其中phage 3和phage 6有较多重复克隆存在,为优势克隆;Western blot分析显示,筛库血清中特异性IgE抗体能有效识别各噬菌体克隆.分别用各克隆噬菌体免疫小鼠,均能诱导特异性IgE抗体产生.结论从12肽噬菌体表面显示肽库中成功筛选到日本血吸虫特异性IgE抗体相关肽表位.
作者:王勇;吴海玮;张兆松;胡雪梅;刘丰;李春玲;季旻珺;吴观陵
来源:中华传染病杂志 2004 年 22卷 6期