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目的设计和制备快速、特异、灵敏的检测大肠埃希菌O157:H7基因芯片.方法选择O157:H7特异的rfbE、fliC、SLT1和SLT2基因,设计引物和探针,并制备检测芯片,通过两次聚合酶链反应(PCR)扩增,制备荧光标记的靶序列,并与芯片进行杂交,检测O157:H7菌株和非O157病原体.结果O157:H7菌株在采用单一和多重PCR两种方法制备的荧光标记靶序列与芯片杂交,均在芯片相应探针处出现阳性信号,非O157杂交结果均为阴性;芯片检测灵敏度比PCR检测高.结论基因芯片可以快速、灵敏、特异地检测O157:H7,为建立快速灵敏的检测细菌病原体和鉴别诊断的自动分析系统提供了新方法.

作者:金慧英;陶开华;李越希;李法卿;张锦海

来源:中华传染病杂志 2005 年 23卷 2期

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作者:
金慧英;陶开华;李越希;李法卿;张锦海
来源:
中华传染病杂志 2005 年 23卷 2期
标签:
大肠埃希菌O157 寡核苷酸序列分析 大肠埃希菌感染/诊断
目的设计和制备快速、特异、灵敏的检测大肠埃希菌O157:H7基因芯片.方法选择O157:H7特异的rfbE、fliC、SLT1和SLT2基因,设计引物和探针,并制备检测芯片,通过两次聚合酶链反应(PCR)扩增,制备荧光标记的靶序列,并与芯片进行杂交,检测O157:H7菌株和非O157病原体.结果O157:H7菌株在采用单一和多重PCR两种方法制备的荧光标记靶序列与芯片杂交,均在芯片相应探针处出现阳性信号,非O157杂交结果均为阴性;芯片检测灵敏度比PCR检测高.结论基因芯片可以快速、灵敏、特异地检测O157:H7,为建立快速灵敏的检测细菌病原体和鉴别诊断的自动分析系统提供了新方法.