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目的 探讨合成的转录反式激活因子-脑源性神经营养因子(TAT-BDNF)融合蛋白对急性脊髓损伤的神经保护作用.方法采用分子克隆方法构建表达载体pTAT-HA-BDNF,原核表达获得TAT-BDNF融合蛋白.尾静脉注射TAT-BDNF 4 h后,通过免疫荧光组织化学染色和Western Blot分析融合蛋白转导至大鼠中枢神经系统内的分布情况.制作大鼠急性压迫性脊髓损伤模型,分为两组:对照组注射生理盐水,实验组注射TAT-BDNF,于损伤后第3天用TUNEL染色观察分析细胞凋亡,通过伤后7 d BBB后肢运动功能评分评价TAT-BDNF是否具有减轻脊髓神经功能丧失的作用.结果 免疫荧光组织化学染色和Western Blot分析均证实TAT-BDNF能够穿过血脐屏障分布至中枢神经系统各层组织细胞中.在脊髓急性压迫性损伤模型中,与对照组比较,实验组能减少神经细胞凋亡(P<0.05).实验组大鼠伤后3、5、7 d的BBB后肢运动功能评分分别为(0.96±0.21)、(3.45±0.81)、(8.06±1.44)分,而对照组分别为(0.58±0.20)、(1.92±0.83)、(3.50±1.64)分,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 TAT-BDNF融合蛋白经静脉给药能通过血脑屏障并减轻脊髓继发性损伤,改善神经功能.

作者:蒋晖;江建明;吴晓亮;金卫林

来源:中华创伤骨科杂志 2011 年 13卷 7期

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作者:
蒋晖;江建明;吴晓亮;金卫林
来源:
中华创伤骨科杂志 2011 年 13卷 7期
标签:
脊髓损伤 血脑屏障 蛋白转导 大鼠 Spinal cord injury Blood-brain barrier Protein transduction Rats
目的 探讨合成的转录反式激活因子-脑源性神经营养因子(TAT-BDNF)融合蛋白对急性脊髓损伤的神经保护作用.方法采用分子克隆方法构建表达载体pTAT-HA-BDNF,原核表达获得TAT-BDNF融合蛋白.尾静脉注射TAT-BDNF 4 h后,通过免疫荧光组织化学染色和Western Blot分析融合蛋白转导至大鼠中枢神经系统内的分布情况.制作大鼠急性压迫性脊髓损伤模型,分为两组:对照组注射生理盐水,实验组注射TAT-BDNF,于损伤后第3天用TUNEL染色观察分析细胞凋亡,通过伤后7 d BBB后肢运动功能评分评价TAT-BDNF是否具有减轻脊髓神经功能丧失的作用.结果 免疫荧光组织化学染色和Western Blot分析均证实TAT-BDNF能够穿过血脐屏障分布至中枢神经系统各层组织细胞中.在脊髓急性压迫性损伤模型中,与对照组比较,实验组能减少神经细胞凋亡(P<0.05).实验组大鼠伤后3、5、7 d的BBB后肢运动功能评分分别为(0.96±0.21)、(3.45±0.81)、(8.06±1.44)分,而对照组分别为(0.58±0.20)、(1.92±0.83)、(3.50±1.64)分,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 TAT-BDNF融合蛋白经静脉给药能通过血脑屏障并减轻脊髓继发性损伤,改善神经功能.