目的 设计一种可同时进行成骨和成软骨诱导的双腔搅拌式生物反应器,探讨其提供的力学刺激能否促进β-磷酸三钙(β-TCP)支架内山羊骨髓基质干细胞(BMSCs)的增殖与分化. 方法 分离培养山羊BMSCs,传至第3代,以5×107/mL接种于β-TCP支架,在双腔搅拌式生物反应器中进行成软骨和成骨诱导.实验分为动态培养组和静态培养组.于培养1、3、7、10、14 d采用Alamar blue法检测细胞的增殖情况(n=5),于培养7、14d应用扫描电镜观察支架内细胞的形态,于培养7、14、21d应用实时定量-聚合酶链反应(PCR)检测Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OC)基因的表达(n=12). 结果 培养1、3、7、10、14 d动态培养组的细胞量均高于静态培养组,差异有统计学意义(P＜0.05).培养7、14d动态培养组支架内的细胞分布和基质分泌较静态培养组多.培养14、21d动态培养组支架内Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、OPN、OC基因表达均高于静态培养组[培养21d时分别为(8.62±0.08)vs.(6.38±0.06)、(7.12±0.10) vs.(4.77±0.06)、(6.23±0.25)vs.(3.78 ±0.14)、(5.25 ±0.06) vs.(3.50±0.12)],差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 本研究设计的双腔搅拌式生物反应器可对β-TCP支架内的BMSCs同时进行成骨和成软骨双向诱导,从而促进支架内BMSCs的增殖与分化.|

作者：黎健伟；杜浩；赵辉；王磊；夏立恒；金丹；王钢；余斌

来源：中华创伤骨科杂志 2013 年 15卷 11期