目的:研究抑制高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对大鼠脊髓损伤(SCI)后星形胶质细胞(AS)基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的作用及分子机制。方法:改良Allen打击法制作Sprague-Dawley(SD)大鼠SCI模型,使用丙酮酸乙酯(EP)或甘草甜素(GL)抑制HMGB1作用,将大鼠分为假手术组、SCI组、SCI+EP(50 mg/kg)组、SCI+GL(100 mg/kg)组,观察大鼠脊髓AS的胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、MMP-9的蛋白表达。体外培养SD大鼠脊髓AS,建立氧糖剥夺/复氧(OGD/R)模型,观察OGD 6 h/R 6、12、24、48 h后脊髓AS的MMP-9蛋白表达,以表达最高的时间点用于后续实验为OGD/R组;通过HMGB1 shRNA或EP抑制HMGB1,观察HMGB1对OGD/R处理AS的MMP-9蛋白表达的作用;并使用Toll样受体4(TLR4)、
β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)及核转录因子-
κB(NF-
κB)的抑制剂,观察HMGB1/TLR4/TRIF/NF-
κB通路在OGD/R处理AS的MMP-9蛋白表达中的作用机制。
结果:Western blot结果表明,SCI后1 d大鼠脊髓MMP-9蛋白表达增高,SCI+EP组和SCI+GL组大鼠脊髓MMP-9蛋白表达较SCI组显著减少,差异均有统计学意义(
P<0.001)。免疫荧光结果表明,GFAP与MMP-9蛋白在SCI后脊髓中共定位表达,SCI+EP组和SCI+GL组大
作者:孙麟;邓晨;梅军;冯小宁;王丽平;刘晋明;吕俊桥
来源:中华创伤骨科杂志 2023 年 25卷 8期