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目的探讨人工诱导RNA干扰技术在EB病毒潜伏膜蛋白1(latent membrane protein-1,LMP-1)功能研究中的应用价值,观察LMP-1基因沉默对鼻咽癌细胞生长的影响. 方法人工合成4条双链不同序列的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),通过脂质体转染导入表达EB病毒基因的鼻咽癌C611细胞后,用半定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)检测LMP-1 mRNA水平,筛选出能有效抑制LMP-1表达的siRNA序列.采用噻唑蓝法和流式细胞仪观察LMP-1表达抑制后,鼻咽癌细胞增殖、凋亡以及细胞周期的变化. 结果导入有效siRNA后,C611细胞中LMP-1 mRNA水平下降90

作者:李刚;李湘平;彭英;刘雄;李晓华

来源:中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2005 年 40卷 6期

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作者:
李刚;李湘平;彭英;刘雄;李晓华
来源:
中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2005 年 40卷 6期
标签:
鼻咽肿瘤 癌,鳞状细胞 疱疹病毒4型,人 癌基因 基因沉默 肿瘤细胞,培养的
目的探讨人工诱导RNA干扰技术在EB病毒潜伏膜蛋白1(latent membrane protein-1,LMP-1)功能研究中的应用价值,观察LMP-1基因沉默对鼻咽癌细胞生长的影响. 方法人工合成4条双链不同序列的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),通过脂质体转染导入表达EB病毒基因的鼻咽癌C611细胞后,用半定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)检测LMP-1 mRNA水平,筛选出能有效抑制LMP-1表达的siRNA序列.采用噻唑蓝法和流式细胞仪观察LMP-1表达抑制后,鼻咽癌细胞增殖、凋亡以及细胞周期的变化. 结果导入有效siRNA后,C611细胞中LMP-1 mRNA水平下降90