目的 探讨强脉冲噪声暴露引起的豚鼠毛细胞损害模式和P53凋亡蛋白在损伤毛细胞中的表达.方法 12只成年豚鼠,声压级168 dB的强脉冲噪声连续暴露80次,每次间隔时间2 s,分别在噪声暴露后3 h、6 h及12 h各处死4只动物,应用异硫氰酸荧光素(flourescein iso-thiocyanate,FITC)标记的鬼笔环肽(phalloidin)和细胞核DNA荧光染料碘化丙啶(propidium iodide,PI)来施行双重染色,在激光共聚焦显微镜下观察耳蜗毛细胞静纤毛和细胞核的形态学变化;将噪声暴露后12 h的耳蜗基底膜样品进行P53免疫荧光染色,观察受损毛细胞中是否存在P53蛋白的表达;耳蜗琥珀酸脱氢酶染色,制备基底膜铺片,400倍显微镜下行毛细胞计数并绘制耳蜗图.结果 强脉冲噪声暴露后3 h,耳蜗底回末端和第二回起始端已经发生明显的外毛细胞结构破坏,同时伴有细胞核的浓缩;暴露后6 h耳蜗毛细胞的破坏范围扩大,在毛细胞损害的中心区域可见外毛细胞的核碎片;毛细胞损害中心区域在噪声暴露后12 h,多数外毛细胞的细胞核消失,而周边区域的毛细胞可见核浓缩或核碎片.耳蜗图显示,噪声暴露后3、6及12 h,耳蜗毛细胞的破坏范围不断扩大.免疫荧光显示耳蜗第二回外毛细胞损伤的中心部位出现明显的P53阳性表达,在耳蜗底回和第三回外毛细胞中亦出现P53的阳性表达.结论 强脉
作者:周义德;丁大连;郑宏良;郑贵亮;沈小华;张青;Richad J.Salvi
来源:中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2011 年 46卷 1期