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目的 探讨自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenire,3-MA)对人下咽癌细胞(Fadu 细胞)的放射增敏作用及其机制.方法 用5mmol/L的3-MA联合2 Gy、4 Gy剂量X线照射作用于Fadu细胞,克隆形成实验和单细胞凝胶电泳技术分别检测各处理组的细胞存活率(克隆形成率)和DNA损伤程度(尾矩),采用两组独立样本的t检验分析各组间差异;用不同浓度的3-MA(1、2、5、10 mmol/L)分别作用于细胞,流式细胞仪检测各组细胞周期并应用单因素方差分析比较组间差异.Western blot检测各组p62和CyclinB1的蛋白表达水平.结果 单独使用3-MA对细胞存活率和DNA 损伤程度无明显影响;与不加3-MA组相比,加3-MA组细胞在2 Gy和4 Gy剂量的X线作用下细胞存活率显著降低(t值分别为13.41、13.98,P值均<0.001),DNA损伤程度明显加重(t值分别为7.07、6.91,P值均<0.001).对照组和1、2、5、10 mmol/L浓度3-MA作用后的G2/M期细胞百分数分别为(17.10±1.20)%、(23.30±2.36)%、(39.90±3.12)%、(58.47±1.65)%、(76.13±3.51)%,组间差异有统计学意义(F=278.4,P<0.001).Western blot方法检测,3-MA作用于细胞后,p62蛋白表达水平呈剂量依赖性上升,CyclinB1蛋白表达水平呈剂量依赖性下降.结论 自噬抑制剂3-MA能加强X线对人下咽癌细胞的致DNA损伤作用和

作者:汤智平;许耀东;彭解人;区永康;关中

来源:中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2012 年 47卷 11期

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作者:
汤智平;许耀东;彭解人;区永康;关中
来源:
中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2012 年 47卷 11期
标签:
下咽肿瘤 腺嘌呤 辐射耐受性 DNA损伤 细胞周期 Hypopharyngeal neoplasms Adenine Radiation tolerance DNA damage Cell cycle
目的 探讨自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenire,3-MA)对人下咽癌细胞(Fadu 细胞)的放射增敏作用及其机制.方法 用5mmol/L的3-MA联合2 Gy、4 Gy剂量X线照射作用于Fadu细胞,克隆形成实验和单细胞凝胶电泳技术分别检测各处理组的细胞存活率(克隆形成率)和DNA损伤程度(尾矩),采用两组独立样本的t检验分析各组间差异;用不同浓度的3-MA(1、2、5、10 mmol/L)分别作用于细胞,流式细胞仪检测各组细胞周期并应用单因素方差分析比较组间差异.Western blot检测各组p62和CyclinB1的蛋白表达水平.结果 单独使用3-MA对细胞存活率和DNA 损伤程度无明显影响;与不加3-MA组相比,加3-MA组细胞在2 Gy和4 Gy剂量的X线作用下细胞存活率显著降低(t值分别为13.41、13.98,P值均<0.001),DNA损伤程度明显加重(t值分别为7.07、6.91,P值均<0.001).对照组和1、2、5、10 mmol/L浓度3-MA作用后的G2/M期细胞百分数分别为(17.10±1.20)%、(23.30±2.36)%、(39.90±3.12)%、(58.47±1.65)%、(76.13±3.51)%,组间差异有统计学意义(F=278.4,P<0.001).Western blot方法检测,3-MA作用于细胞后,p62蛋白表达水平呈剂量依赖性上升,CyclinB1蛋白表达水平呈剂量依赖性下降.结论 自噬抑制剂3-MA能加强X线对人下咽癌细胞的致DNA损伤作用和