目的 原代培养豚鼠耳蜗血管纹毛细血管周细胞(PCs),探讨TMEM16A在耳蜗血管纹PCs上的表达变化及其对衰老耳蜗血管纹PCs凋亡的影响.方法 原代培养耳蜗血管纹PCs并鉴定;运用β-半乳糖苷酶染色确定细胞衰老模型;全细胞膜片钳技术记录PCs上CaCCs的电流变化;免疫荧光检测耳蜗血管纹PCs上TMEM16A的表达变化;Western Blot技术检测TMEM16A和凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白水平;流式细胞术检测各组细胞凋亡率.结果 原代培养的耳蜗血管纹PCs阳性率在95％以上,确定第13代耳蜗血管纹PCs为衰老组.全细胞膜片钳记录到衰老组较年轻组PCs上CaCCs电流密度增大.与年轻组PCs相比,衰老组周细胞上TMEM16A、Cas-pase-3、Bax表达升高,Bcl-2表达下降,细胞凋亡率明显升高.衰老组给予30μmol/L T16Ainh-A01干预24 h后,Caspase-3、Bax表达下降,Bcl-2表达升高,细胞凋亡率明显下降.结论 衰老的耳蜗血管纹PCs凋亡增多且TMEM16A表达增加,TMEM16A特异性阻断剂T16Ainh-A01可以减少衰老耳蜗血管纹PCs的凋亡.提示TMEM16A可能参与衰老耳蜗血管纹PCs的凋亡.
作者：李雪蕊；冯子奕；陈龙；徐少然；邓双；马克涛；司军强；李丽
来源：中华耳科学杂志 2021 年 19卷 1期
