目的 探讨HER-2小分子干扰RNA(siRNA)对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞侵袭和趋化能力的影响.方法 选用已知的干扰磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)的特异性位点作为阳性对照,采用蛋白印迹法检测卵巢癌细胞株SKOV3细胞GAPDH蛋白和HER-2蛋白的表达水平,以吸光度(A)值表示.然后在HER-2基因的编码区内根据干涉位点的筛选原则,选择HER-2 siRNAⅠ、HER-2 siRNAⅡ、HER-2 siRNAⅢ 3段靶序列,体外转录合成HER-2 siRNA.实验分为4组:空白对照组、脂质体组、非特异性转染组(非特异性siRNAⅢ)、特异性转染组(HER-2 siRNAⅢ),以β肌动蛋白(β-actin)作为内参照,用荧光实时定量PCR和蛋白印迹法检测转染前后SKOV3细胞HER-2 mRNA和蛋白表达的变化;细胞侵袭实验和细胞趋化实验检测转染前后SKOV3细胞体外侵袭和趋化能力的变化.结果 GAPDH siRNA 能明显抑制SKOV3细胞内源性GAPDH蛋白的表达,空白对照及加入不同剂量(0.5、1.0、1.5、2.0 μg)的GAPDH siRNA转染SKOV3细胞后,其GAPDH蛋白的表达水平分别为0.6855±0.0259、0.5698±0.0275、0.4542±0.0296、0.3341±0.0178及0.1816±0.0180,各剂量间比较,差异有统计学意义(F=198.126,P＜0.01).HER-2 siRNAⅡ、HER-2 siRNAⅢ均有抑制HER-2蛋白表达的作用,HER-2 siRNAⅡ、HER-2 siRNAⅢ转染后SKO

作者：张淑兰；鲁艳明；孟丽荣；赵彦艳

来源：中华妇产科杂志 2007 年 42卷 1期