目的；探讨微小RNA-21( miR-21)在卵巢癌细胞生长、凋亡中的作用及调节机制。方法构建表达miR-21的重组干扰载体pSIREN-miR-21质粒，采用酶切鉴定和测序法证实。实验分为3组，即转染组：卵巢癌细胞株OVCAR3细胞转染重组干扰载体pSIREN-miR-21质粒；阴性对照组：OVCAR3细胞转染阴性对照pSIREN-miR-21-Neg质粒；空白对照组：OVCAR3细胞不转染质粒。采用茎环实时荧光定量逆转录(RT)-PCR技术检测3组细胞中miR-21的表达，蛋白印迹法检测3组细胞中程序性细胞死亡因子4( PDCD4)蛋白的表达，四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪检测3组细胞的增殖及凋亡情况。结果成功构建了表达miR-21的重组干扰载体pSIREN-niR-21质粒，并经酶切鉴定和测序法证实。转染组、阴性对照组和空白对照组OVCAR3细胞中niR-21的表达水平分别为0.26±0.08、1.26±0.21和1.00，转染组明显低于阴性对照组和空白对照组，差异有统计学意义(P＜0.01)。转染组、阴性对照组和空白对照组OVCAR3细胞中PDCD4蛋白的灰度值分别为1443 ±33、858±19和846±16，转染组明显高于阴性对照组和空白对照组，差异有统计学意义(P＜0.01)。转染组、阴性对照组和空白对照组OVCAP3细胞增殖的A值分别为0.661±0.015、0.848±0.150、0.935±0.133，转染组明显低于
作者：娄艳辉；崔竹梅；王福玲；杨兴升
来源：中华妇产科杂志 2011 年 46卷 9期
