目的 检测和分选人卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞系OVCAR-3中的侧群(SP)细胞,鉴定其是否具有肿瘤干细胞的生物学特性.方法 OVCAR-3细胞经DNA染料Hoechst 33342染色后,采用流式细胞仪检测和分选低染(即SP细胞)和高染[即非侧群(NSP)细胞]的两群细胞.通过裸鼠体内的有限稀释成瘤试验对比SP和NSP细胞的成瘤能力[以成瘤比率(成瘤的裸鼠数/接种的裸鼠数)和成瘤时间表示]、自我更新和分化能力.实时PCR技术检测SP和NSP细胞中干性基因(Oct4、Klf4、Nanog基因)和三磷酸腺苷结合盒(ABC)转运蛋白家族重要分子——ABCG2、ABCB1、ABCC2基因的表达.药敏试验检测SP和NSP细胞对4种化疗药物(顺铂、紫杉醇、多柔比星、米托蒽醌)的敏感性.结果 OVCAR-3细胞系中可检测到少量的SP细胞,其比例为(1.13±0.39)%.102个SP细胞即可在裸鼠体内成瘤,成瘤比率为2/5,成瘤时间为52~61 d;而至少104个NSP细胞才能成瘤,成瘤比率为2/5,成瘤时间为64 ~ 98 d.SP细胞的成瘤性至少为NSP细胞的100倍.103个SP细胞接种裸鼠后所形成的瘤组织中SP细胞的比例为(2.09±0.73)%,与分选前的比例相似.SP细胞中干性基因Oct-4和Klf4及ABCG2和ABCC2基因的表达量分别是NSP细胞的(1.95±0.41)、(4.26±0.63)、(3.22 ±0.36)和(1.76±0.26)倍,分别比较,差异均有
作者:骆黎静;赵喆;曾建芳;梁兵;杨佳欣;曹冬焱;沈铿
来源:中华妇产科杂志 2012 年 47卷 4期