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目的 探讨子痫前期孕妇的胎盘组织中微小RNA-106b(miR-106b)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达及miR-106b靶向调控MMP-2的表达对滋养细胞侵袭和增殖的影响.方法 共纳入30例轻度子痫前期(mPE)、30例重度子痫前期(sPE)和40例正常孕妇,分别为mPE组、sPE组及对照组,收集其胎盘组织;将绒毛膜癌细胞系JAR细胞和JEG3细胞各分为4组(miR-106b模拟物组、模拟物对照组、miR-106b抑制物组、抑制物对照组).采用荧光素酶报告基因活性检测法验证miR-106b对其靶基因MMP-2基因表达的调控作用;采用实时荧光定量PCR技术、蛋白印迹法检测3组孕妇的胎盘组织和各组细胞中miR-106b和MMP-2 mRNA、蛋白的表达水平;并采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞的相对增殖率,采用体外侵袭实验检测各组细胞的侵袭力.结果 (1)荧光素酶报告基因活性检测法显示,含miR-106b的质粒和含MMP-2基因的重组质粒共同转染JAR细胞和JEG3细胞后,与模拟物对照比较,其荧光素酶水平下降(P<0.01).(2)实时荧光定量PCR技术显示:①mPE组、sPE组及对照组孕妇的胎盘组织中,miR-106b和MMP-2 mRNA的表达水平分别为2.89±0.04、1.96±0.03、1.01±0.03,1.87±0.05、0.69±0.03、2.78±0.03,3组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).②4组JAR细胞和4组JEG3细胞(m

作者:李静;王金铭;刘月华;张展;韩宁;王婧彦;薛闪辉;王萍

来源:中华妇产科杂志 2017 年 52卷 5期

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作者:
李静;王金铭;刘月华;张展;韩宁;王婧彦;薛闪辉;王萍
来源:
中华妇产科杂志 2017 年 52卷 5期
标签:
先兆子痫 微RNAs 基质金属蛋白酶2 滋养层 细胞增殖 Pre-eclampsia MicroRNAs Matrix metalloproteinase 2 Trophoblasts Cell proliferation
目的 探讨子痫前期孕妇的胎盘组织中微小RNA-106b(miR-106b)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达及miR-106b靶向调控MMP-2的表达对滋养细胞侵袭和增殖的影响.方法 共纳入30例轻度子痫前期(mPE)、30例重度子痫前期(sPE)和40例正常孕妇,分别为mPE组、sPE组及对照组,收集其胎盘组织;将绒毛膜癌细胞系JAR细胞和JEG3细胞各分为4组(miR-106b模拟物组、模拟物对照组、miR-106b抑制物组、抑制物对照组).采用荧光素酶报告基因活性检测法验证miR-106b对其靶基因MMP-2基因表达的调控作用;采用实时荧光定量PCR技术、蛋白印迹法检测3组孕妇的胎盘组织和各组细胞中miR-106b和MMP-2 mRNA、蛋白的表达水平;并采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞的相对增殖率,采用体外侵袭实验检测各组细胞的侵袭力.结果 (1)荧光素酶报告基因活性检测法显示,含miR-106b的质粒和含MMP-2基因的重组质粒共同转染JAR细胞和JEG3细胞后,与模拟物对照比较,其荧光素酶水平下降(P<0.01).(2)实时荧光定量PCR技术显示:①mPE组、sPE组及对照组孕妇的胎盘组织中,miR-106b和MMP-2 mRNA的表达水平分别为2.89±0.04、1.96±0.03、1.01±0.03,1.87±0.05、0.69±0.03、2.78±0.03,3组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).②4组JAR细胞和4组JEG3细胞(m