目的:探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)及其抑制剂依那西普(ETA)对原因不明复发性流产(URSA)患者绒毛外滋养细胞侵袭力的调控作用及机制。方法:(1)选取2019年3—6月就诊于北京大学第一医院的URSA患者(
n=15)为URSA组,同期正常早孕期人工流产妇女(
n=15)为对照组,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测两组绒毛组织中TNF-α mRNA的表达水平。(2)体外培养绒毛外滋养细胞系HTR-8/SVneo,使用TNF-α(0.2、2、20 ng/ml)单独刺激HTR-8/SVneo细胞以及TNF-α(2 ng/ml)联合ETA(3 μg/ml)共同刺激HTR-8/SVneo细胞,以磷酸盐缓冲液(PBS)为对照,通过qRT-PCR技术和蛋白印迹法(western blot)检测侵袭因子基质金属蛋白酶2(MMP-2)、锌指转录因子Slug和CXC型趋化因子受体4(CXCR4)mRNA和蛋白的表达水平。(3)通过细胞侵袭实验检测TNF-α及其抑制剂ETA对HTR-8/SVneo细胞侵袭力的影响。(4)核因子κB(NF-κB)抑制剂BAY 11-7082预处理HTR-8/SVneo细胞后再加入TNF-α(2 ng/ml),通过qRT-PCR技术和western blot检测MMP-2、Slug和CXCR4 mRNA和蛋白的表达水平。
结果:(1)URSA组患者绒毛组织中TNF-α mRNA的表达水平(4.10±0.49)显著升高,是对照组的4.1倍,两组比较,差异有
作者:李昕;吴培莉;朱靓雯;薛晴;杨慧霞
来源:中华妇产科杂志 2021 年 56卷 10期