目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中干扰素诱导蛋白3(IFIT3)基因mRNA的实时定量表达水平与SLE疾病特异性和病情活动度的相关性,同时构建IFIT3基因的真核表达载体pGFP-IFIT3以备研究其免疫学功能.方法收集144例SLE患者、27例非SLE患者与59名正常对照人群的临床资料,取外周血抽提总RNA并逆转录成cDNA,运用SYBR green实时定量聚合酶链反应(PCR)法检测患者组和对照组的IFIT3 mRNA表达水平的差异,并与病情活动度进行分组比较,分析其意义.用gateway基因克隆技术,将含有IFIT3开放阅读框(ORF)序列的穿梭质粒与GFP融合蛋白表达载体pGFP-DEST53连接为重组子,构建IFIT3基因的真核表达载体pGFP-IFIT3,并进行酶切电泳和测序鉴定.结果①SLE患者组的IFIT3 mRNA-△△CT值显著高于非SLE对照组(P=0.012)和正常对照组(P=0.000).②SLE活动组的IFIT3 mRNA-△△CT值显著高于SLE非活动组(P=0.036),SLE患者组的IFIT3 mRNA-△△CT值与SLE疾病活动指数(SLEDAI)积分有非常显著的正相关性(P=0.005).③构建的重组真核表达pGFP-DEST53质粒经酶切电泳和测序鉴定,分子大小与序列均正确.结论作为干扰素诱导表达的基因,IFIT3 mRNA定量表达水平的升高对SLE患者的诊断有一定的意义,同时对SLE患者的病情活动度和病情严重
作者:汤建平;黄向阳;陈晓翔;李挺;陆瑜;钱捷;吕良敬;李春明;沈南;顾越英
来源:中华风湿病学杂志 2005 年 9卷 12期