目的 探讨Sox9基因转染对骨髓间充质干细胞(MSCs)成软骨分化的影响.方法 采用密度梯度离心和贴壁培养法分离兔骨髓MSCs,体外培养扩增.阳离子脂质体介导重组真核表达Sox9质粒转染骨髓MSCs,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹实验(Westem blot)的方法检测基因产物的表达,荧光显微镜和流式细胞术测定细胞转染效率;四甲基噻唑蓝(MTT)法测定基因转染对细胞增殖能力的影响,流式细胞术对转基因细胞进行细胞周期分析;通过Westem blot,RT-PCR和免疫组织化学染色的方法检测Sox9基因转染对MSCs成软骨分化的影响.结果 脂质体介导Sox9基因可以成功地转染兔骨髓MSCs;Sox9基因转染对细胞增殖能力无明显影响;基因转染后的细胞表达软骨分化特异性分子Ⅱ型胶原,Sox9,aggrecan等明显增加.结论 Sox9基因转染骨髓MSCs可以获得稳定表达,基因表达产物可以促进骨髓MSCs向软骨方向的分化.
作者:杨自权;何俊仁;李刚;杨述华;卫小春
来源:中华风湿病学杂志 2008 年 12卷 7期