目的 建立小鼠Th17细胞体外培养方法并研究姜黄素对Th17细胞分化、功能的影响及机制.方法 分离、纯化小鼠脾脏CD4+CD25-T细胞,培养体系内加入抗CD3、抗CD28抗体活化,并加入转化生长因子(TGF)-β、白细胞介素(IL)-6、IL-23、抗干扰素-γ抗体、抗IL-2抗体等促进Th17细胞分化.培养的Th17细胞分为对照组、姜黄素低剂量(5 μmol/L)及高剂量(25 μmol/L)组、西罗莫司(100 ng/ml)组.流式细胞术检测Th17细胞比例,荧光定量聚合酶链反应(PCR)及蛋白印迹法检测视黄酸相关孤儿受体(ROR)γt表达水平及信号转导和转录活化因子(STAT)3磷酸化水平,最后检测细胞IL-17A、IL-21mRNA相对表达量.采用t检验、单因素方差分析对实验结果进行统计学处理.结果 本方案可明显促进Th17细胞分化.与对照组相比,姜黄素低组、高剂量组及西岁莫司组Th17细胞比例明显降低[分别为(54.1±3.4)
作者:吴迪英;徐鹏杰;张豪杰;蔡旭东
来源:中华风湿病学杂志 2011 年 15卷 7期