目的 观察甲状旁腺激素肽1-34(PTH1-34)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成脂分化的影响.方法 ①应用贴壁培养法分离大鼠BMSCs,观察细胞的形态学特征,流式细胞仪检测细胞表面标志物.②诱导BMSCs定向分化为成骨细胞和脂肪细胞,并通过组织染色的方法进行鉴定.③以P3代BMSCs为体外试验模型,不同浓度PTH 1-34(0、10-10、10-9、10-8 mol/L)分别作用于加入成脂诱导液的BMSCs,14d后采用ELISA法测定脂蛋白脂肪酶(LPL)活性,采用反转录(RT)-PCR法测定ALP和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)-2 mRNA的表达.采用方差分析和LSD-t检验进行统计学分析.结果 ①P3代细胞表达抗原CD29、CD44,不表达抗原CD45,符合BMSCs表面标志物特征.②成脂诱导液诱导BMSCs分化21d后,油红0染色可见胞内脂滴出现,成骨诱导28 d后,茜素红染色可见红色钙结节.③与空白对照组比较,不同浓度PTH 1-34(10-10、10-9、10-8 mol/L)组LPL的表达量分别为11.20±0.16、7.62±0.48、5.84±0.57、5.32±0.52,PPARγ-2 mRNA的表达量分别是2.80±0.05、1.36±0.23、0.94±0.11、0.78±0.04,ALP活性分别为0.191±0.016、0.333±0.024、0.549±0.025、0.684±0.021,随着PTH1-34浓度的增加,IPL的表达量及PPARγ-2 mRNA的表达量下降,ALP活性增加,并呈剂量依赖性(P
作者:高飞;葛志敏;郭中豪;杨静
来源:中华风湿病学杂志 2015 年 19卷 4期