目的 探讨钙网蛋白对RA成纤维样滑膜细胞(FLS)存活的影响,为深入揭示钙网蛋白在RA发病机制中的作用及寻找新的治疗靶点奠定实验基础.方法 采用胶原酶消化法分离RA和OA患者滑膜组织中的FLS并进行体外培养.应用实时荧光定量-聚合酶链反应(q-PCR)、蛋白质印迹法以及细胞免疫荧光等技术,检测RA和OA FLS中抗凋亡分子Bcl-XL和Mcl-1的表达;进一步应用q-PCR、蛋白质印迹法检测在不同浓度钙网蛋白刺激下,RA和OA FLS中Bcl-XL和Mcl-1的表达;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测钙网蛋白对RA FLS增殖的影响;采用t检验及单因素方差分析进行统计学分析.结果 ①RA FLS中抗凋亡分子Bcl-XL和Mcl-1的mRNA表达水平(14.51±2.20;12.82±1.80)与OA对照组(1.00±0.39;1.00±0.46)相比均明显升高(t=10.47,11.02;P均＜0.01);RA FLS中Bcl-XL和Mcl-1的蛋白表达水平较OA对照组也明显升高;RA FLS中Bcl-XL和Mcl-1荧光染色与OA对照组相比显著增强.②钙网蛋白可使RA FLS中Bcl-XL和Mcl-1的表达上调:钙网蛋白刺激浓度为10 ng/ml和50 ng/ml时,RA FLS中Bcl-XL的mRNA表达水平(1.70±0.28;1.87±0.35)较对照组(1.00±0.20)明显升高(q=4.58,5.69;P＜0.05);Mcl-1的mRNA表达水平(1.85±0.36;1.72±0.26)较对照组(1.00±0.20)也明显升高(q=5.63,4.77;P＜

作者：丁红梅；刘建华；魏蔚；贾曙光；赵雁艳；孟海妹；郑芳

来源：中华风湿病学杂志 2016 年 20卷 12期