目的:探讨健康者和RA患者血浆来源外泌体对人静脉内皮细胞功能的影响。方法:收集健康者和RA患者血浆,用试剂盒分离外泌体后,通过透射电镜观察其形态特征、纳米颗粒分析仪(NTA)测量其大小及免疫印迹实验对表面标志蛋白进行鉴定。通过CCK8、细胞划痕、Transwell小室实验检测外泌体对内皮细胞增殖和迁移侵袭能力的影响;RT-PCR检测细胞分泌缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)含量变化。采用
t检验。
结果:透射电镜观察到双凹圆盘状的囊性小泡,纳米颗粒跟踪分析(NTA)测其直径在50~150 nm,蛋白质印迹法显示出血浆外泌体表面标志蛋白flotillin1和CD81,相对分子质量分别为47 000和26 000。内皮细胞活性随着外泌体浓度增高而降低,但2组差异均无统计学意差义(
t=1.86,
P>0.05)。与健康者血浆外泌体相比,RA血浆外泌体可显著抑制内皮细胞迁移[(2.24±0.23)和(1.46±0.13),
t=6.60,
P<0.05],侵袭能力减弱[(0.673±0.030)和(0.827±0.030),
t=8.11,
P<0.05],分泌HIF-1α、VEGF细胞因子的能力也显著降低,差异均有统计学意义[(0.706±0.020)和(0.908±0.040),
t=10.10,
P<0.05;(0.692±0.010)和
作者:李培霆;周海燕;刘俊;李龙;曾家顺
来源:中华风湿病学杂志 2020 年 24卷 9期