目的 探讨乏氧诱导因子1α(HIF-1α)在辐射诱导人乳腺癌MCF-7细胞自噬性死亡中的作用.方法 将人乳腺癌MCF-7细胞分为对照组(常氧组,21%氧气)、照射组(8GyX射线)、乏氧组(150 μmol/L CoCl2)、乏氧加照射组(150 μmol/L CoCl2+8 Gy).150 μmol/L CoCl2处理细胞模拟乏氧条件.Western blot法检测HIF-1α及MAPLC3蛋白表达;MDC及Hoechst染色方法分别用于检测细胞自噬和凋亡变化情况;克隆形成方法检测细胞辐射敏感性.构建携带人靶向HIF-1α-siRNA的反转录病毒载体,建立MCF-7 HIF-1α Ri沉默细胞模型,将细胞分为对照组(常氧组)、照射组(8 Gy)、乏氧组(CoCl2处理)、乏氧加照射组(CoCl2+8 Gy),检测细胞辐射敏感性、自噬及凋亡情况.结果 与对照组和照射组相比,HIF-1蛋白在乏氧组和乏氧加照射组表达明显增加,分别为0、0、1.00和1.89.与对照组相比,MAPLC3蛋白在照射组、乏氧组、乏氧加照射组的表达均明显上调,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值分别为1.15、1.73、2.38和3.60.细胞辐射敏感性顺次降低,常氧+三甲基腺嘌呤(3MA)组>常氧组>乏氧+3MA组>乏氧组.成功构建HIF-1α沉默模型(pSUPER-HIF-1α Ri)与空载体对照模型(pSUPER),并检测了2种细胞的辐射敏感性.与常氧组相比,乏氧组MCF-7-pSUPER细胞存活分数显著增加(t=3.080、6.946、
作者:徐慧英;刘晓冬;董永强;李文娜;李彩虹;刘兵;马淑梅
来源:中华放射医学与防护杂志 2012 年 32卷 5期