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目的 研究X射线外照射对体外原代培养的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)生长、增殖的影响及作用机制。方法 体外培养VSMC,给予单次8?MV X射线照射,源皮距为100cm,剂量率400?cGy/min。按照射剂量分为2、5、10、15、20?Gy组,以0?Gy为对照组。分别采用细胞计数法、克隆形成实验、四唑盐(MTT)比色实验、伊红排斥实验、流式细胞术及末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术,动态观察对VSMC生长、增殖、死亡率、凋亡的影响。结果 ①照射后24?h VSMC数降低,72?h后明显恢复(P<0.05)。②照射后48?h内VSMC吸光度(A570)值降低,72?h 2、5?Gy组A570值升高,而10、15、20?Gy组升高不明显(P<0.05)。③72?h内10、15、20?Gy组VSMC死亡率较高,6?d后,各剂量组死亡率下降至较低水平(P<0.05)。④克隆形成实验提示X射线照射可直接导致DNA链断裂,引起细胞死亡。⑤碘化丙啶(PI)染色流式细胞仪直方图上可见亚二倍体峰,TUNEL法阳性细胞核呈棕黄色,荧光镜下可见凋亡小体。结论 X射线外照射可抑制VSMC的生长和增殖,可能通过两种不同的机制即致死性和(或)亚致死性损伤及诱导凋亡导致VSMC死亡。为应用放射治疗防治血管成形术后再狭窄提供了理论依据。

作者:朱丽红;申文江;李平;张强

来源:中华放射肿瘤学杂志 2001 年 10卷 2期

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作者:
朱丽红;申文江;李平;张强
来源:
中华放射肿瘤学杂志 2001 年 10卷 2期
标签:
血管平滑肌细胞,原代培养 X射线照射 凋亡 大鼠
目的 研究X射线外照射对体外原代培养的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)生长、增殖的影响及作用机制。方法 体外培养VSMC,给予单次8?MV X射线照射,源皮距为100cm,剂量率400?cGy/min。按照射剂量分为2、5、10、15、20?Gy组,以0?Gy为对照组。分别采用细胞计数法、克隆形成实验、四唑盐(MTT)比色实验、伊红排斥实验、流式细胞术及末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术,动态观察对VSMC生长、增殖、死亡率、凋亡的影响。结果 ①照射后24?h VSMC数降低,72?h后明显恢复(P<0.05)。②照射后48?h内VSMC吸光度(A570)值降低,72?h 2、5?Gy组A570值升高,而10、15、20?Gy组升高不明显(P<0.05)。③72?h内10、15、20?Gy组VSMC死亡率较高,6?d后,各剂量组死亡率下降至较低水平(P<0.05)。④克隆形成实验提示X射线照射可直接导致DNA链断裂,引起细胞死亡。⑤碘化丙啶(PI)染色流式细胞仪直方图上可见亚二倍体峰,TUNEL法阳性细胞核呈棕黄色,荧光镜下可见凋亡小体。结论 X射线外照射可抑制VSMC的生长和增殖,可能通过两种不同的机制即致死性和(或)亚致死性损伤及诱导凋亡导致VSMC死亡。为应用放射治疗防治血管成形术后再狭窄提供了理论依据。