目的 探讨重组红细胞生成素受体(EPOR)干扰RNA慢病毒抑制人脑胶质瘤细胞中EPORmRNA的表达情况.方法 选择人脑胶质瘤U251细胞株和人胚肾293T细胞株为研究对象.利用RNA干扰技术构建重组EPOR干扰RNA慢病毒表达载体,进行病毒包装、病毒收集、病毒滴度检测后,感染人脑胶质瘤U251细胞,选择最佳MOI值;采用实时聚合酶链式反应(RT-PCR)检测U251细胞和感染重组EPOR干扰RNA慢病毒的U251细胞EPOR mRNA相对表达量,并计算重组EPOR干扰RNA慢病毒对于U251细胞EPOR mRNA表达的干扰效率.结果 ①本研究成功构建重组EPOR干扰RNA慢病毒表达载体,并测定其病毒滴度为1×1014 TU/L.②MOI值为100的重组EPOR干扰RNA慢病毒感染U251细胞的荧光蛋白表达量最高,MOI值为1的荧光蛋白表达量最低.③重组EPOR干扰RNA慢病毒对于U251细胞的干扰效率为69％,并使EPOR mRNA表达明显受到抑制.结论 成功构建重组EPOR干扰RNA慢病毒表达载体,使U251细胞的EPOR mRNA相对表达量明显降低,为后续EPOR转录水平变化的相关研究奠定实验基础.
作者：兰海霞；呼格吉乐
来源：中华妇幼临床医学杂志（电子版） 2015 年 11卷 6期
