目的 探讨脂筏在Toll样受体(TLR)4促进宫颈癌低氧诱导因子(HIF)-1α高活性中的作用及机制.方法 采用体外细胞实验,对按照计算机随机法分为4组宫颈癌Siha细胞,分别采用4种方法进行处理:对于甲基-β-环糊精(MβCD)+脂多糖组进行MβCD处理及脂多糖刺激,siTLR4+脂多糖组进行siTLR4转染及脂多糖刺激,空白对照组不进行上述处理及刺激,脂多糖对照组仅进行脂多糖刺激.对4组宫颈癌Siha细胞,进行以下项目检测和观察:①采用MTT比色法测定宫颈癌Siha细胞悬液光密度(OD)值,并绘制Siha细胞生长抑制曲线,通过软琼脂集落培养实验,观察各组Siha细胞集落形成情况.②采用免疫细胞化学染色法和Western印迹法检测宫颈癌Siha细胞内HIF-1α蛋白阳性表达及含量变化.③光泽精化学发光法检测还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(N ADPH)氧化酶活性,DCFH-DA探针检测宫颈癌Siha细胞内活性氧含量.④采用免疫荧光染色法检测脂筏与HIF-1α蛋白的共定位关系.统计学比较上述各项检测,于4组间或处理后不同时间点(0、12、24、36、48 h)的差异.结果 ①MTT比色法和软琼脂集落培养实验结果显示,脂多糖对照组宫颈癌Siha细胞活性和集落数,均较空白对照组高或多,而MβCD+脂多糖组及siTLR4+脂多糖组,则较空白对照组或脂多糖对照组低或少,并且差异均有统
作者：杨潇；王艳清；程艳香
来源：中华妇幼临床医学杂志（电子版） 2017 年 13卷 1期
