目的 应用无血清培养基培养胰腺癌干细胞,检测其微RNA 575 (miR-575)的表达.方法 应用无血清培养基培养ASPC-1和PANC-1细胞系,分离成球样悬浮生长的细胞球群作为胰腺癌干细胞,并通过检测侵袭、成瘤能力和表面标记物CD24/CD44表达等验证其肿瘤于细胞特性.荧光定量逆转录PCR技术检测miR-575在胰腺癌干细胞中的表达.结果 ASPC-1和PANC-1细胞系中分别有一小部分细胞能在无血清培养基中存活增殖,形成悬浮的肿瘤细胞球.ASPC-1和PANC-1细胞球的平均穿膜细胞数分别为(147,3±18.6)个和(113.2±12.9)个,较细胞系具有较强的侵袭能力.ASPC-1和PANC-1细胞球移植形成肿瘤所需最少细胞数为5×10 5个,其成瘤能力是普通细胞系的100倍.ASPC-1、PANC-1细胞球CD24+CD44十比例分别为0.38％～0.43％、4.91％～5.21％,高于细胞系中的表达(P＜0.05).ASPC 1和PANC-1细胞球miR-575表达量分别是胰腺癌细胞系的3.71、3.83倍,表达上调(P＜0.05).结论 应用无血清培养基可以从ASPC-1和PANC-1细胞系中分离出少量具有干细胞特性的胰腺癌细胞球.其miR-575表达上调,可能是胰腺癌干细胞特性维持关键基因.
作者：宫伟强；杜福田；丁维宝；林洪峰；董承伟
来源：中华肝胆外科杂志 2013 年 19卷 12期
