目的 制备甲胎蛋白(AFP)特异性CD8+T淋巴细胞肝癌疫苗,检测其体外抗肿瘤免疫活性,探讨其分子作用机制.方法 采用经AFP抗原决定簇肽(AFP542-550)或转染AFP慢病毒刺激树突状细胞(AFP5422-550/Lenti-AFP-DC)的方法,体外活化AFP特异性CD8+T细胞(AFP-CD8+-CTL).用抗人CD134单抗/抗人CD28单抗分别封闭和活化AFP-CD8+-CTL,观察其体外杀伤HepG2细胞的作用以及IFN-γ、IL-2、穿孔素(Perforin)、颗粒酶B(Granzyme B)、FasL等细胞因子的释放,间接推测穿孔素-颗粒酶B在其抗肿瘤过程中的作用.结果 抗人CD134单克隆抗体封闭AFP-CD8+-CTL后,AFP-CD8+-CTL体外杀伤HepG2细胞产生的γ干扰素、白介素-2、穿孔素/颗粒酶B等细胞因子明显减少(P＜0.05),而FasL下降不明显.应用抗人CD28单抗体外活化AFP-CD8+-CTL后并与HepG2细胞共同培养后发现,AFP特异性T细胞肝癌疫苗杀伤HepG2肝癌细胞的效能显著增加(P＜0.05),而FasL增加不明显.结论 抗人CD134单克隆抗体可用于体外抑制AFP-CD8+-CTL对肿瘤细胞的杀伤作用,而抗人CD28单克隆抗体可体外活化AFP-CD8+-CTL.AFP特异性CD8+T淋巴细胞肝癌疫苗杀伤HepG2细胞可能与穿孔素-颗粒酶B的释放有关.
作者：刘扬；王跃如；丁光辉；杨庭松；姚乐；荀林娟；庄英；张柏和；陆崇德
来源：中华肝胆外科杂志 2016 年 22卷 1期
