目的 探讨微小RNA-137(miR-137)调控Notch1基因并介导自噬对肝癌细胞增殖和迁移的影响.方法 体外培养人SMMC7721肝癌细胞系,用miR-137模拟物、miR-137抑制物以及Notch1基因的干扰RNA(siRNA)转染细胞,分为正常对照组(NC组)、miR-137模拟物组、miR-137抑制物组、Notch1 siRNA组.采用实时定量-PCR (RT-PCR)检测SMMC7721细胞转染后miR-137与Notch1 mRNA的表达.细胞迁移实验(Transwell)分析miR-137及Notch1基因对SMMC7721细胞迁移侵袭的影响.细胞免疫组化观察SMMC7721细胞β-链蛋白(β-catenin)和波形蛋白(vimentin)的表达情况,自噬双标腺病毒检测SMMC7721细胞自噬体个数的变化.采用蛋白印迹法(Western blot)检测Notch1基因、上皮型钙黏蛋白(E-Cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-Cadherin)、vimentin、选择性自噬接头蛋白(P62)及微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达.结果 实时荧光定量PCR (RT-PCR)结果显示miR-137抑制物组Notch1基因的相对表达含量(5.71±0.45)明显高于miR-137模拟物组(0.21±0.06),差异有统计学意义(P＜0.05).Transwell实验显示miR-137模拟物组(66.00 ±4.55)和Notch1 siRNA组(88.00 ±6.78)肝癌细胞侵袭转移的个数较miR-137抑制物组(515.00±35.12)明显降低(P＜0.05).细胞组化检测显示miR-137模拟物组

作者：宋虎；张建军；李世朋；王振；杜晨阳；郑虹；沈中阳

来源：中华肝胆外科杂志 2018 年 24卷 1期