目的:探讨自噬对Sprague-Dawley(SD)大鼠梗阻性黄疸肝损伤的影响及其机制。方法:健康雄性SD大鼠35只,SPF级,6~8周龄,200~300 g,分为5组:假手术组(单纯游离胆总管,不结扎,腹腔内注射生理盐水)、胆总管结扎(OJ)组(游离胆总管,并双重丝线结扎,腹腔内注射生理盐水)、OJ+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、OJ+雷帕霉素(Rapamycin)组和OJ+3-MA+VX-765组,每组7只。HE染色观察肝脏组织学变化。免疫组化染色检测自噬相关蛋白Atg5表达水平。全自动生化仪检测肝功能。酶联免疫吸附试剂盒检测血清白细胞介素(IL)-18水平。蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白水平及内质网应激相关凋亡通路。结果:通过免疫组化染色,OJ组自噬相关蛋白Atg5相对表达量较假手术组增加[(5.0±1.0)比(2.8±1.3)],差异有统计学意义(
t=-3.00,
P<0.05)。与假手术组比较,OJ组自噬活性增加,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1/p-65及炎症因子IL-18水平升高,同时内质网发生应激并诱导其相关性凋亡。应用自噬抑制剂3-MA后,与OJ组比较,OJ+3-MA组中Caspase-1/p-65蛋白水平及炎症因子IL-18水平增加,同时肝损伤加重;而应用自噬激动剂Rapamycin后,与OJ组比较,OJ+Rapamycin组中Caspase-1/p-65蛋白水平及炎症因子IL-18水平下降,同时肝
作者:叶健文;陈文辉;彭有梅;齐蕾;唐红卫;刘文韬;王义涛
来源:中华肝胆外科杂志 2022 年 28卷 2期