目的：通过对膝骨关节炎（ KOA） Kellgren-Lawrence分级（ K-L分级）的各阶段的血清样本进行同位素标记相对和绝对定量（ iTRAQ）蛋白组学分析，查找正常组与KOA组的血清差异蛋白。方法收集符合美国风湿病学院诊断标准KOA患者60例，再参照K-L分级标准，分为K-L 0、Ⅱ、Ⅳ级3个亚组进行对比，每个亚组单纯随机抽样选取10例男性与10例女性。去除血清高丰度蛋白，进行稳定同位素116、117、118的iTRAQ标记、反相色谱柱分离、质谱检测，采用Swissport数据库检索蛋白峰图，并行生物信息学分析。采用Western blot技术对代表性血清差异蛋白行表达验证。并采用Image J软件计算条带的曝光值，分析差异蛋白组间差异。结果通过对不同样品的iTRAQ肽段实验标记、Q-star质谱鉴定和Mascot蛋白搜索软件搜库，共筛选出有意义差异蛋白169个。通过K-L 0级组与K-LⅡ级、Ⅳ级组对比，共筛选出有意义差异蛋白89个，其中上调的差异蛋白有75个，下调的差异蛋白有14个。通过Western blot验证结果显示，与正常对照组相比，脂联素蛋白在KOA患者血清中表达量上调（F＝10.06，P＜0.05），C反应蛋白表达下调（F＝6.26，P＜0.05）。结论本实验通过iTRAQ定量蛋白组学分析和Western blot验证发现脂联素蛋白在KOA患者的血清中的上调表达。脂
作者：梁海波；苏伟；罗世兴；董桂甫；龙光华；覃育接
来源：中华关节外科杂志（电子版） 2016 年 10卷 5期
