目的:运用分子生物学方法观察小泛素样修饰蛋白(small ubiquitin-related modifier,SUMO)通路成员在骨肉瘤中的表达特点,为基于蛋白质SUMO化修饰的靶向治疗提供理论依据。方法:收集2017年1月至2019年6月于我院就诊并手术的新鲜骨肉瘤组织样本18例,经Western blot及免疫组织化学方法检测癌灶及癌旁SUMO通路核心成员SUMO1、SAE1、Ubc9、SENP1的蛋白表达水平。分别干涉SUMO1、干涉UBC9及过表达SENP1,进行如下分组:空白对照组、对照组、siR-SUMO1组、siR-Ubc9组和SENP1组。Western blot验证基因转染效率,细胞增殖检测试剂盒检测EdU的阳性表达率,划痕实验及Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡率。以骨髓间充质干细胞(BMSCs)为研究对象,评估三种治疗方案的副作用。结果:Western blot及免疫组织化学结果均显示,骨肉瘤组织中SUMO1、SAE1、Ubc9的蛋白表达水平均明显高于癌旁组织(
P<0.05),但SENP1明显低于癌旁组织。基于143B骨肉瘤细胞的实验结果表明,siR-SUMO1组、siR-Ubc9组、SENP1组均能够明显抑制骨肉瘤细胞中SUMO通路的活化,表现为较对照组和无义组更低的肿瘤细胞增殖率(
P<0.05),更低的细胞迁移和侵袭能力(
P<0.05),以及更高的细
作者:于康;韩秀鑫;王国文;马育林;张超;张瑾;李丽丽
来源:中华骨科杂志 2020 年 40卷 13期