目的:应用蛋白质非标记定量技术和生物信息学分析筛查脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）患者血浆外泌体蛋白分子标志物。方法:收集2021年1月至2022年6月南京医科大学第一附属医院SCI患者及健康对照人群血浆标本各50份。使用超速离心法分离血浆外泌体，通过透射电子显微镜、纳米粒子跟踪分析和Western blot对外泌体进行鉴定。利用Label-Free定量蛋白质组学分析血浆外泌体差异表达蛋白（differentially expressed proteins，DEPs），并基于基因本体（Gene Ontology，GO）和基因功能和基因组信息（kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）数据库对DEPs进行表征、注释和富集分析。利用血浆外泌体标本对筛选出的DEPs进行Western blot和酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）验证。结果:根据美国脊柱损伤协会脊髓损伤分级：A级14例、B级19例、C级12例、D级5例。SCI患者的血浆外泌体与对照组外泌体均呈现典型的杯状形态，直径30~200 nm。经蛋白质非标记定量技术共鉴定出493种外泌体蛋白，筛选出126种蛋白质差异表达，其中38种上调、88种下调。GO注释显示了DEPs主要参与蛋白质激活级联、补体激活和免疫反应等功能。KEGG富集分析显示了DEPs参与补体和凝血级联反应、蛋白酶体

作者：戎玉罗；王壮晖；唐鹏宇；周炜；凡进；张文志；周许辉；曹晓建；殷国勇；蔡卫华

来源：中华骨科杂志 2023 年 43卷 14期