] 目的研究针对血小板衍生生长因子(PDGF)受体β亚单位基因的核酶的制备与体外切割活性鉴定. 方法将大鼠PDGF受体β亚单位基因的PCR片段克隆于T载体T7启动子下游,32P标记的体外转录物作为靶RNA;设计并合成针对大鼠PDGF受体β亚单位胞外区的核酶,将核酶基因克隆于自我切割核酶载体P1.5的5′-cis核酶和3′-cis核酶之间,并进行32P标记的转录.核酶与靶RNA按一定比例和条件进行切割反应电泳,放射自显影. 结果核酶制备正确,在最适条件下具有切割活性.其Km=13.20nM,Kcat=0.28min-1.最高切割效率达78.3
作者:陆翠华;张忠兵;陈岳祥;张兴荣;卫立辛;郭亚军;金由辛
来源:中华肝脏病杂志 2001 年 9卷 5期