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目的观察不同活化状态肝星状细胞 (HSC) 对外源性转化生长因子-β1(TGF-β1)旁分泌刺激的生物学效应作用. 方法原代分离培养大鼠HSC,无包被塑料培养皿上分别培养1、4、7d,细胞处于静止、中间活化与完全活化状态,继以10~500pmol/L TGF-β1温育细胞24h,3H-TdR掺入法测定细胞增殖,western blot法检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)与I型胶原蛋白表达沉积,3H-脯氨酸掺入与胶原酶消化法测定细胞总胶原的分泌量.100pmol/L TGF-β1温育细胞15~90min,northern blot法检测细胞I型前胶原mRNA的表达水平. 结果 TGF-β1浓度依赖性抑制培养1d HSC的细胞增殖,10~500pmol/L TGF-β1浓度组细胞内3H-TdR掺入率分别为对照组的52.8

作者:刘成海;宣红萍

来源:中华肝脏病杂志 2003 年 11卷 12期

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作者:
刘成海;宣红萍
来源:
中华肝脏病杂志 2003 年 11卷 12期
标签:
转化生长因子-β1 肝硬化 胶原
目的观察不同活化状态肝星状细胞 (HSC) 对外源性转化生长因子-β1(TGF-β1)旁分泌刺激的生物学效应作用. 方法原代分离培养大鼠HSC,无包被塑料培养皿上分别培养1、4、7d,细胞处于静止、中间活化与完全活化状态,继以10~500pmol/L TGF-β1温育细胞24h,3H-TdR掺入法测定细胞增殖,western blot法检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)与I型胶原蛋白表达沉积,3H-脯氨酸掺入与胶原酶消化法测定细胞总胶原的分泌量.100pmol/L TGF-β1温育细胞15~90min,northern blot法检测细胞I型前胶原mRNA的表达水平. 结果 TGF-β1浓度依赖性抑制培养1d HSC的细胞增殖,10~500pmol/L TGF-β1浓度组细胞内3H-TdR掺入率分别为对照组的52.8