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目的通过小鼠甲胎蛋白(AFP)与结核分枝杆菌热休克蛋白70(HSP70)基因融合制备DNA疫苗,研究该种DNA疫苗诱导小鼠的免疫应答及其对荷瘤小鼠的治疗作用.方法应用分子克隆技术构建AFP与HSP70的融合表达载体,免疫实验共分5组:磷酸盐缓冲液组、pcDNA3.1组、pcDNA3.1-AFP组、pcDNA3.1-HSP70组、pcDNA3.1-AFP-HSP70组(融合疫苗组),每组7只小鼠.2次免疫后分离小鼠脾细胞,体外诱导细胞毒性T淋巴细胞做杀伤实验,以乳酸脱氢酶法检测杀伤率,以酶联免疫吸附法检测脾细胞释放的干扰素γ;体外培养小鼠肝癌细胞系Hepa1-6,以每200μl 4×106细胞数在C57BL/6J小鼠右前腋皮下注射作荷瘤鼠模型,以融合疫苗免疫荷瘤鼠,观测肿瘤大小评价融合疫苗的治疗作用.结果AFP与HSP70的融合疫苗能诱导AFP特异性细胞毒性T淋巴细胞反应,HSP70对于该反应有增强作用(P<0.05),杀伤率在效:靶比为50:1时为32

作者:兰英华;李用国;陈敏;唐俐;任红

来源:中华肝脏病杂志 2006 年 14卷 7期

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作者:
兰英华;李用国;陈敏;唐俐;任红
来源:
中华肝脏病杂志 2006 年 14卷 7期
标签:
甲胎蛋白 热休克蛋白70 疫苗,DNA 癌,肝细胞
目的通过小鼠甲胎蛋白(AFP)与结核分枝杆菌热休克蛋白70(HSP70)基因融合制备DNA疫苗,研究该种DNA疫苗诱导小鼠的免疫应答及其对荷瘤小鼠的治疗作用.方法应用分子克隆技术构建AFP与HSP70的融合表达载体,免疫实验共分5组:磷酸盐缓冲液组、pcDNA3.1组、pcDNA3.1-AFP组、pcDNA3.1-HSP70组、pcDNA3.1-AFP-HSP70组(融合疫苗组),每组7只小鼠.2次免疫后分离小鼠脾细胞,体外诱导细胞毒性T淋巴细胞做杀伤实验,以乳酸脱氢酶法检测杀伤率,以酶联免疫吸附法检测脾细胞释放的干扰素γ;体外培养小鼠肝癌细胞系Hepa1-6,以每200μl 4×106细胞数在C57BL/6J小鼠右前腋皮下注射作荷瘤鼠模型,以融合疫苗免疫荷瘤鼠,观测肿瘤大小评价融合疫苗的治疗作用.结果AFP与HSP70的融合疫苗能诱导AFP特异性细胞毒性T淋巴细胞反应,HSP70对于该反应有增强作用(P<0.05),杀伤率在效:靶比为50:1时为32