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目的 研究La蛋白与乙型肝炎病毒(HBV)mRNA稳定性和蛋白质表达之间的相关性.方法 设计并合成La蛋白mRNA特异性小干扰RNA(siRNA),转染HepG2.2.15细胞,继续培养3 d后分别裂解转染和未转染siRNA的细胞;抽提蛋白质,Western blot检测La蛋白含量变化;于转染后的第1、2、3、5、7、9天分别收集细胞培养上清液,实时荧光定量聚合酶链反应技术检测上清液中HBV DNA的变化情况,电化学发光分析技术检测乙型肝炎表面抗原,乙型肝炎e抗原含量变化情况.结果 La蛋白在转染siRNA的HepG2.2.15细胞中表达明显低于未转染siRNA的细胞;转染siRNA的细胞分泌到上清液中乙型肝炎表面抗原、乙型肝炎e抗原和HBV DNA的含量也明显低于未转染siRNA的细胞.结论 在HepG2.2.15细胞内,La蛋白与HBV mRNA稳定性和蛋白质表达具有功能相关性.

作者:张慧;孙静慧;耿红莲;范列英;刘皋林;谭龙益

来源:中华肝脏病杂志 2006 年 14卷 10期

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作者:
张慧;孙静慧;耿红莲;范列英;刘皋林;谭龙益
来源:
中华肝脏病杂志 2006 年 14卷 10期
标签:
RNA干扰 肝炎病毒,乙型 La蛋白
目的 研究La蛋白与乙型肝炎病毒(HBV)mRNA稳定性和蛋白质表达之间的相关性.方法 设计并合成La蛋白mRNA特异性小干扰RNA(siRNA),转染HepG2.2.15细胞,继续培养3 d后分别裂解转染和未转染siRNA的细胞;抽提蛋白质,Western blot检测La蛋白含量变化;于转染后的第1、2、3、5、7、9天分别收集细胞培养上清液,实时荧光定量聚合酶链反应技术检测上清液中HBV DNA的变化情况,电化学发光分析技术检测乙型肝炎表面抗原,乙型肝炎e抗原含量变化情况.结果 La蛋白在转染siRNA的HepG2.2.15细胞中表达明显低于未转染siRNA的细胞;转染siRNA的细胞分泌到上清液中乙型肝炎表面抗原、乙型肝炎e抗原和HBV DNA的含量也明显低于未转染siRNA的细胞.结论 在HepG2.2.15细胞内,La蛋白与HBV mRNA稳定性和蛋白质表达具有功能相关性.