目的 通过对大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)中内源性转化生长因子β3 (TGF- β 3)mRNA和蛋白水平的检测,探讨外源性TGF- β 3对HSC-T6分泌内源性TGF-β3的影响.方法 体外培养HSC-T6,未加入外源性TGF-β 3培养的细胞为对照组,加入外源性TGF-β 3(10 ng/ml)培养的细胞为TGF-β 3组.(1)分别在l、2、4、12h和24h收集细胞,用实时荧光定量PCR法检测内源性TGF-β 3 mRNA表达;(2)分别在0、l、6h和12h收集细胞,用Western blot法检测细胞内TGF-β 3蛋白的表达;(3)分别在0、1、2、4、8、14h和24h收集细胞上清液,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞外总TGF-β 3蛋白的表达;加入外源性TGF-β 3培养HSC-T6 2 h,然后换用无血清的DMEM培养液继续培养细胞至2.25、2.5、3、4、6、10h和14h收集细胞上清液,用ELISA法检测细胞外内源性TGF-β 3蛋白的表达.对数据进行单因素方差分析.结果 (1)TGF-β 3组细胞内TGF-β 3 mRNA表达水平明显增高,于2h达峰值(2.796±0.518),为对照组(1.022±0.038)的2.74倍(P＜0.05);随后缓慢降低,维持在1.45倍水平达10h,24h时表达水平仍为对照组的1.18倍(P＜0.05).(2)不同时间点细胞内TGF-β3表达水平均无明显变化(P＞0.05).(3) TGF-β 3组细胞外总TGF-β 3含量明显增加,于4h时达高峰[(18.931±2.904)ng/ml

作者：李莹；邓亮；钱伟；周建宁；徐可树

来源：中华肝脏病杂志 2011 年 19卷 11期