目的 在蛋白质水平检测Ech1在小鼠肝癌高低淋巴道转移Hca-F细胞/Hca-P细胞中的表达及其对Hca-F细胞黏附能力的影响. 方法 采用荧光差异双向凝胶电泳(2D DIGE)和质谱技术定量分析鉴定Ech1在Hca-F细胞和Hca-P细胞中的表达;构建pGPU6/GFP/Neo-shRNA-Ech1质粒,稳定转染至Hca-F细胞中,并通过实时荧光定量PCR和Western blot验证Echl表达下调效果;检测Ech1基因表达下调后对细胞外基质和淋巴结的黏附能力.各组细胞间的差异采用单因素方差分析.结果 Ech1在Hca-F细胞的表达明显高于其在Hca-P细胞表达;Ech1表达下调细胞株构建成功;Ech1基因表达下调后,降低Hca-F细胞对细胞外基质纤维连接蛋白和Ⅰ型胶原成分的黏附能力,降低其对体内淋巴结的黏附能力.Hca-F组与pGPU 6/GFP/Neo-shRNA-Fch1组黏附吸光度值的差异有统计学意义,层黏连蛋白和Ⅰ型胶原吸光度值分别为1.42±0.26和1.14±0.07与1.01±0.27和0.90±0.09,P值均＜0.05.结论 抑制Ech1基因和蛋白的表达,可以降低小鼠肝癌细胞株Hca-F细胞的黏附能力.
作者：张军；唐建武；孙明忠；刘淑清；宋美英；王波；宋波；黄玉红
来源：中华肝脏病杂志 2012 年 20卷 8期
