目的 研究干扰素刺激基因ISG20对HCV的抑制作用及其机制,为探索丙型肝炎新的治疗方法提供依据. 方法 将含ISG20基因,其无功能突变体ISG20m和相应空白载体的质粒pcDNA3.1瞬时转染Huh7、Huh7.5和HEK293细胞,观察ISG20对HCV单顺反子复制子pSGRm-JFH1blaRL的抑制作用.同时将含ISG20、ISG20m基因和相应空白质粒的逆转录病毒载体pCX4Bsr转染Huh7.5细胞,建立稳定表达该基因的细胞系.将pSGRm-JFH1blaRL复制子转染ISG20细胞系,观察ISG20对该复制子的抑制作用.用细胞培养产生的HCV感染ISG20细胞系,探索其对HCV复制滴度的影响.数据比较用两因素多水平重复测量的方差分析. 结果 成功构建了稳定表达ISG20及其突变体的细胞系7.5-ISG20、7.5-ISG20m和质粒对照7.5-Bsr,免疫荧光证实ISG20和ISG20m表达于细胞质和细胞核.pSGRm-JFH1blaRL RNA在7.5-ISG20细胞中的复制被严重抑制,在所检测的各个时间点,其复制水平为7.5-ISG20m和7.5-Bsr细胞中的9.1％～ 16.7％.在Huh7、Huh7.5和HEK293细胞中,瞬时表达的ISG20对HCV复制子RNA也有明显的抑制作用,其复制水平为对照的16.7％ ～ 25.0％.HCV在7.5-ISG20细胞中扩增得到相似的结果,在感染后48～ 72h,HCV在7.5-ISG20细胞上清液中的滴度为7.5-ISG20m和7.5-Bsr细胞中的9.1％～ 12.5％.Wes

作者：徐华；雷宇；钟珊；彭凤英；周智；李奎；任红

来源：中华肝脏病杂志 2013 年 21卷 1期