目的 制备Y盒结合蛋白1磷酸化抗体(pAb/YB-1S102);探讨腹水中磷酸化YB-1 (pYB-1)作为标志物辅助诊断原发性肝癌合并肺转移的临床价值. 方法 通过生物信息学预测并化学合成102位丝氨酸磷酸化YB-1多肽,耦联载体蛋白后免疫家兔;protein A亲和层析法纯化抗血清pAb/YB-1S102,并验证其特异性.收集109例患者腹水并富集腹水中pYB-1,其中原发性肝细胞癌(HCC) 36例,HCC合并肺转移44例,肝硬化29例;采用Western blot定性检测腹水中pYB-1,并对定性结果进行回归判别与受试者工作特征(ROC)曲线分析.计数资料采用x2检验.结果 酶联免疫吸附法与十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示制备的pAb/YB-1S102效价≥1∶1×106,且纯度较高.Western blot结果证实pAb/YB-1S102能特异性识别内源性pYB-1S102.肝硬化患者腹水中未检出pYB-1S102,HCC合并肺转移患者腹水pYB-1S102阳性率(77.3%)显著高于HCC(30.6%,x2=11.69,P<0.01);回归分析与ROC曲线结果表明pYB-1S102辅助诊断HCC合并肺转移的灵敏度为77.3%,符合率为73.8%(x2=17.56,P<0.01). 结论 成功制备可识别内源性pYB-1的抗体pAb/YB-1102;通过定性检测腹水pYB-1,可鉴别诊断HCC合并肺转移.
作者:聂红;史静;王玎;麦力;赵清;胡琴;陈维贤;李朴
来源:中华肝脏病杂志 2015 年 23卷 7期