目的 探索不同浓度氯化铵(NH4C1)处理对Changliver细胞缺氧诱导因子(HIF)-1α及血管内皮生长因子(VEGF)基因mRNA和蛋白表达的影响. 方法 培养人正常Changliver 肝细胞,用不同浓度NH4Cl(1.25 mmol/L、2.5 mmol/L和5 mmol/L)持续处理,以正常培养的Changliver细胞作为对照组,分别在传至5代、10代及15代时提取RNA及蛋白质,应用荧光定量PCR、免疫组织化学方法和蛋白免疫印迹技术检测HIF-1α和VEGF基因的表达.结果 qPCR结果:与对照组相比,NH4Cl处理组细胞HIF-1αmRNA表达量明显增加(5代、10代和15代组内比较F值分别为:90 976.659,1 300.218,1 896.800,P值均<0.05),VEGF mRNA表达量明显增加(5代、10代和15代组内比较F值分别为:3 554.143,2 381.321,2 591.954,P值均<0.05);免疫组织化学检测结果:与对照组相比,NH4C1处理组细胞HIF-1α蛋白表达量明显增加(5代、10代和15代组内比较F值分别为:376.709,1 615.358,1 350.120,P<值均0.05),VEGF蛋白表达量明显增加(5代、10代和15代组内比较F值分别为:904.789,5 105.186,8 644.498,P值均<0.05);蛋白免疫印迹检测结果:与对照组相比,NH4C1处理组细胞HIF-1α蛋白表达量明显增加(5代、10代和15代组内比较F值分别为:228.499,6 051.974,183.219,P值均<0.05),VEGF蛋白表达量
作者:谷红丽;杨荟玉;李晶晶;李越;赵雪萌;周永健;陈晓龙;阚全程;余祖江
来源:中华肝脏病杂志 2016 年 24卷 7期