目的 探讨烟碱型乙酰胆碱受体α7(α 7nAChR)基因对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠肝脏炎症的作用及其机制. 方法 C57BL/6J小鼠和α 7nAChR基因敲除小鼠饲养24周建立NASH模型,然后处死小鼠、分离培养原代肝脏巨噬细胞;给予烟碱以及内毒素处理后,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中炎症因子白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)α的水平;细胞间接免疫荧光和Westtern blot观察其对信号通路核因子(NF)-κ B的影响;定量PCR检测巨噬细胞中Toll样受体(TLR)-4 mRNA表达水平.多组间均数比较采用方差分析. 结果 ELISA结果表明细胞培养上清液中IL-6、TNF α 浓度在基因敲除NASH小鼠内毒素+烟碱组分别为(1 599±65)pg/ml、(1 567±66) pg/ml,较C57 NASH小鼠内毒素+烟碱组[(1 465±45) pg/ml、(1 433±50)pg/ml]明显升高(P值均<0.05).Western blot结果表明磷酸化NF-κB、TLR-4的蛋白相对表达水平在基因敲除NASH小鼠内毒素+烟碱组分别为5 825±60、6 387±68,较C57 NASH小鼠内毒素+烟碱组的5 863±20、6 198±63明显升高(P值均<0.05);细胞间接免疫荧光结果也显示,基因敲除NASH小鼠内毒素+烟碱组的NF-κB荧光强度明显高于C57 NASH小鼠内毒素+烟碱组.PCR结果表明TLR-4 mRNA相对表达水平在基因敲除NASH小鼠内毒素+烟
作者:李富强;吴小翠;徐丽娜;陈小梅;陆思;唐翠兰
来源:中华肝脏病杂志 2016 年 24卷 10期