目的 探讨乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)促进HBV相关肝癌细胞系HepG2.2.15细胞侵袭的效应及Toll样受体4(TLR4)在其中发挥的作用.方法 应用反转录实时定量PCR法和Western blot法检测HepG2细胞和HepG2.2.15细胞中TLR4的表达水平.TLR4特异性小干扰RNA (siRNA)转染HepG2.2.15细胞以沉默TLR4,并用重组HBcAg刺激培养,利用Transwell嵌入式平板培养法观察细胞侵袭,并检测培养细胞中TLR4信号通路相关蛋白的表达和培养上清液中促炎细胞因子的表达情况.据资料不同分别采用Student t、One-WayANOVA和SNK-q检验进行统计学分析.结果 HepG2.2.15细胞中TLR4 mRNA和蛋白的表达水平均较HepG2细胞中明显升高.TLR4 siRNA转染可显著降低HepG2.2.15细胞中TLR4的表达水平.抑制TLR4表达和(或)HBcAg刺激均不影响HepG2.2.15细胞增殖.但是,HBcAg刺激可显著提高HepG2.2.15细胞侵袭能力和促炎细胞因子(包括干扰素γ,白细胞介素1β、6、8和肿瘤坏死因子α)的分泌,HBcAg刺激后的侵袭细胞数[(386±36)个]较未刺激组[(98±10)个]明显增加(P=0.000 2);而抑制TLR4表达可显著降低HBcAg介导的细胞侵袭[(205±16)个对比(386±36)个],P=0.001 3.同时,HBcAg刺激可增加HepG2.2.15细胞中MyD88和TLR衔接蛋白的表达,而TLR4基因沉默可抑制HBcAg诱导的MyD

作者：侯环荣；康谊；李玉魁；曾艳丽；魏君锋；丁岗强；彭真；尚佳

来源：中华肝脏病杂志 2017 年 25卷 12期