目的 肝癌细胞的上皮间质转化(EMT)与其恶性行为密切相关.而肿瘤微环境对肿瘤细胞的EMT的调控尤为重要.探明肿瘤相关巨噬细胞(TAM)调控Hep3B肝癌细胞发生EMT的可能机制,为肝细胞癌(HCC)的临床研究和治疗提供新的方案. 方法 将人白血病单核细胞系(THP-1)成功诱导为TAM.以TAM为靶细胞,分别用Hep3B肝癌细胞的上清液以及与Hep3B细胞共培养的形式干预,用蛋白质印迹法(Western blot)及RT-PCR方法检测TAM的Toll样受体(TLR)4表达变化.用质粒瞬时转染shRNA方法下调TAM的TLR4表达.以Hep3B肝癌细胞为靶细胞,分别用TAM上清液以及转染了shRNA TLR4质粒的TAM的上清液干预,用Western blot方法检测Hep3B肝癌细胞的E-cadherin、N-cadherin及Vimentin蛋白表达.两独立样本均数的比较采用双侧f检验. 结果 THP-1细胞被成功诱导为TAM.Western blot结果显示,与对照组比较,TAM干预组(TAM-CM组)的Hep3B细胞E-cadherin蛋白表达降低、N-cadherin及Vimentin蛋白表达升高.当下调TAM的TLR4表达后,用其培养液干预Hep3B细胞,此时,Hep3B细胞的E-Cadherin表达量较TAM-CM组明显增加,而N-cadherin及Vimentin蛋白表达明显减少.此外,Western blot及RT-PCR结果显示,TAM的TLR4受体表达水平受Hep3B肝癌细胞的影响.TAM组TLR4基因的表达高于TAM+HCC-C

作者：姚蓉蓉；王咪咪；王艳红

来源：中华肝脏病杂志 2018 年 26卷 4期