目的 探讨腺病毒介导的短发夹RNA(shRNA)下调第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)表达对体外活化肝星状细胞(HSC)p130Crk相关底物蛋白(p130Cas)及桩蛋白信号转导的影响.方法 体外培养活化大鼠肝星状细胞系HSC-T6,以腺病毒为载体,将靶向PTEN的shRNA瞬时转染体外活化HSC,构建体外活化HSC的PTEN低表达模型,采用Western blot及实时荧光定量PCR技术检测活化HSC的PTEN 、p130Cas及桩蛋白的蛋白及mRNA表达.实验分组:对照组:以DMEM代替腺病毒液转染HSC;Ad-绿色荧光蛋白(GFP)组:转染仅表达GFP的空病毒Ad-GFP;Ad-shRNA/PTEN组:转染携带靶向PTEN的shRNA并表达GFP的重组腺病毒Ad-shRNA/PTEN.多组间均数比较采用单因素方差分析,组间比较采用LSD检验.结果 靶向PTEN的shRNA成功转染并显著下调体外活化HSC的PTEN蛋白及mRNA表达(P＜0.05),体外活化HSC的PTEN低表达模型成功构建.3组HSC的P130Cas RNA表达比较,以对照组 HSC的P130Cas mRNA表达量为1,则Ad-GFP组和Ad-shRNA/PTEN组HSC的P130Cas mRNA相对对照组的表达倍数分别为1.01倍、1.52倍,Ad-shRNA/PTEN组HSC的P130Cas mRNA表达明显高于对照组及Ad-GFP组(P＜0.05),而对照、组与Ad-GFP组之间差异无统计学意义(P＞0.05);3组HSC的p130Cas蛋白表达比较,Ad-shRNA/P

作者：郝礼森；张朋垒；刘博；章广玲；陈静；宋洁；张明婷；靳丽敏

来源：中华肝脏病杂志 2019 年 27卷 12期