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目的 探讨嘌呤受体P2Y2在骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨和成脂分化中的作用及其分子机制.方法 体外分离培养大鼠BMSCs,取第3代细胞进行实验.使用实时定量聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测BMSCs成骨和成脂分化基因的表达,茜素红染色和油红O染色分别检测钙结节和脂滴的生成.使用三磷酸尿苷(uridine triphosphate,UTP)作为P2Y2受体激动剂,使用P2Y2和P2Y4受体小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)、P2Y6受体拮抗剂评估P2Y2受体在UTP对BMSCs成骨和成脂分化影响中的作用.蛋白免疫印迹(Western blot)法检测UTP及P2Y2受体对丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)通路的影响.结果 与对照组相比较,25和125μmol/L浓度的UTP可以使BMSCs细胞成骨特异性转录因子(RUNX2)的表达分别下降19%和62%、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的表达分别下降56%和55%、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达分别下降26%和70%,使细胞过氧化物酶体增生物激活受体γ(peroxisome prolifer-ator activated receptorγ,PPARγ)分别增加38%和52%、脂肪酸结合蛋白4(fatty acid binding protein 4,FABP4)分别增加17%和29%、

作者:李文凯;张英驰;杨勇;吴华

来源:中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志 2021 年 14卷 1期

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作者:
李文凯;张英驰;杨勇;吴华
来源:
中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志 2021 年 14卷 1期
标签:
P2Y2受体 三磷酸尿苷 骨髓间充质干细胞 成骨分化 成脂分化
目的 探讨嘌呤受体P2Y2在骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨和成脂分化中的作用及其分子机制.方法 体外分离培养大鼠BMSCs,取第3代细胞进行实验.使用实时定量聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测BMSCs成骨和成脂分化基因的表达,茜素红染色和油红O染色分别检测钙结节和脂滴的生成.使用三磷酸尿苷(uridine triphosphate,UTP)作为P2Y2受体激动剂,使用P2Y2和P2Y4受体小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)、P2Y6受体拮抗剂评估P2Y2受体在UTP对BMSCs成骨和成脂分化影响中的作用.蛋白免疫印迹(Western blot)法检测UTP及P2Y2受体对丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)通路的影响.结果 与对照组相比较,25和125μmol/L浓度的UTP可以使BMSCs细胞成骨特异性转录因子(RUNX2)的表达分别下降19%和62%、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的表达分别下降56%和55%、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达分别下降26%和70%,使细胞过氧化物酶体增生物激活受体γ(peroxisome prolifer-ator activated receptorγ,PPARγ)分别增加38%和52%、脂肪酸结合蛋白4(fatty acid binding protein 4,FABP4)分别增加17%和29%、