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目的 探讨铁调素对小鼠单核细胞株RAW264.7向破骨样细胞分化过程的影响及活性氧(reactive oxygen species,ROS)在其中的作用.方法 常规培养两组RAW264.7,一组作为对照,另一组以1.6μmol/L铁调素(hepcidin,Hepc)干预,以巨噬细胞集落刺激因子、核因子-κB受体活化因子配体诱导向破骨样细胞分化,分化能力采用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色检测.采用免疫荧光(immunofluorescence,IF)检测膜铁转运蛋白(ferroportin,FPN)表达水平,同时检测细胞内铁离子水平差异.二氯二氢荧光素(dichlorodihydrofluorescein,DCFH)荧光探针标记并检测细胞ROS水平差异.抗氧化剂吡咯烷二硫代甲酸铵(pyrrolidine dithiocarbamate ammonium,PDTC)干预后采用TRAP染色检测破骨样细胞分化水平.结果 铁调素干预后小鼠破骨样细胞分化能力增强,TRAP阳性染色细胞增多(P<0.001).IF结果示铁调素干预后,破骨样细胞FPN表达下调.铁含量检测试剂盒检测结果表明铁调素可升高破骨样细胞内铁水平.进一步检测DCFH荧光示铁调素使细胞ROS水平升高.进一步使用抗氧化剂PDTC干预可抑制破骨样细胞分化(P<0.001),降低铁调素对破骨样细胞分化的促进作用.结论 铁调素可封闭破骨样细胞胞膜FPN,造成胞内高铁状态,上调ROS水平,

作者:王啸;孙婧悦;钱晨月;王爱飞;华俊;徐又佳

来源:中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志 2022 年 15卷 3期

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作者:
王啸;孙婧悦;钱晨月;王爱飞;华俊;徐又佳
来源:
中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志 2022 年 15卷 3期
标签:
骨质疏松症 活性氧 铁调素 破骨样细胞
目的 探讨铁调素对小鼠单核细胞株RAW264.7向破骨样细胞分化过程的影响及活性氧(reactive oxygen species,ROS)在其中的作用.方法 常规培养两组RAW264.7,一组作为对照,另一组以1.6μmol/L铁调素(hepcidin,Hepc)干预,以巨噬细胞集落刺激因子、核因子-κB受体活化因子配体诱导向破骨样细胞分化,分化能力采用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色检测.采用免疫荧光(immunofluorescence,IF)检测膜铁转运蛋白(ferroportin,FPN)表达水平,同时检测细胞内铁离子水平差异.二氯二氢荧光素(dichlorodihydrofluorescein,DCFH)荧光探针标记并检测细胞ROS水平差异.抗氧化剂吡咯烷二硫代甲酸铵(pyrrolidine dithiocarbamate ammonium,PDTC)干预后采用TRAP染色检测破骨样细胞分化水平.结果 铁调素干预后小鼠破骨样细胞分化能力增强,TRAP阳性染色细胞增多(P<0.001).IF结果示铁调素干预后,破骨样细胞FPN表达下调.铁含量检测试剂盒检测结果表明铁调素可升高破骨样细胞内铁水平.进一步检测DCFH荧光示铁调素使细胞ROS水平升高.进一步使用抗氧化剂PDTC干预可抑制破骨样细胞分化(P<0.001),降低铁调素对破骨样细胞分化的促进作用.结论 铁调素可封闭破骨样细胞胞膜FPN,造成胞内高铁状态,上调ROS水平,