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目的 探讨99Tcm标记的小鼠双微体扩增基因2(MDM2) mRNA的ASON和错义寡核苷酸(ASONM)对前列腺癌细胞株LNCaP目的基因表达的影响,为后续的前列腺癌基因显像奠定基础.方法 人工合成一段针对MDM2 mRNA的ASON和ASONM,以HYNIC为螯合剂,对ASON和ASONM进行99Tcm标记,检测标记率、放化纯、稳定性及分子杂交活性.用脂质体包裹99Tcm-HYNIC-ASON(0、100和500 nmol/L)和99Tcm-HYNIC-ASONM(500 nmol/L),于LNCaP细胞中培养24h,再行RT-PCR和Westem blot实验,观察探针对MDM2、p53 mRNA和相应蛋白质表达的影响.各组间计量资料比较采用单因素方差分析和q检验.结果 ASON的标记率为(65.15±2.05)%(n=5),ASONM的标记率为(64.93±2.18)%(n=5),两者放化纯均达90%以上.99Tcm-HYNIC-ASON稳定性好,保留了与互补链结合的能力.0、100、500 nmol/L 99Tcm-HYNIC-ASON组和500 nmol/L99Tcm-HYNIC-ASONM组MDM2mRNA含量分别为0.458±0.035、0.250±0.026、0.174±0.032、0.463±0.033,除0 nmol/L 99Tcm-HYNIC-ASON组与500 nmol/L99Tcm-HYNIC-ASONM组间外,余差异均有统计学意义(F=33.69,q=24.32~ 91.45,均P<0.01);各组MDM2蛋白的平均密度分别为90.712±3.042、71.218±2.915、32.775±3.062、88.121±2.710,同样除0 nmol/L 99Tcm-HYNIC-A

作者:吴琼;张月红;付鹏;田国梅;赵长久

来源:中华核医学与分子影像杂志 2014 年 34卷 2期

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作者:
吴琼;张月红;付鹏;田国梅;赵长久
来源:
中华核医学与分子影像杂志 2014 年 34卷 2期
标签:
前列腺肿瘤 基因表达 寡核苷酸类,反义 锝 小鼠双微体扩增基因2 Prostatic neoplasms Gene expression Oligonucleotides,antisense Technetium Mouse double minute 2
目的 探讨99Tcm标记的小鼠双微体扩增基因2(MDM2) mRNA的ASON和错义寡核苷酸(ASONM)对前列腺癌细胞株LNCaP目的基因表达的影响,为后续的前列腺癌基因显像奠定基础.方法 人工合成一段针对MDM2 mRNA的ASON和ASONM,以HYNIC为螯合剂,对ASON和ASONM进行99Tcm标记,检测标记率、放化纯、稳定性及分子杂交活性.用脂质体包裹99Tcm-HYNIC-ASON(0、100和500 nmol/L)和99Tcm-HYNIC-ASONM(500 nmol/L),于LNCaP细胞中培养24h,再行RT-PCR和Westem blot实验,观察探针对MDM2、p53 mRNA和相应蛋白质表达的影响.各组间计量资料比较采用单因素方差分析和q检验.结果 ASON的标记率为(65.15±2.05)%(n=5),ASONM的标记率为(64.93±2.18)%(n=5),两者放化纯均达90%以上.99Tcm-HYNIC-ASON稳定性好,保留了与互补链结合的能力.0、100、500 nmol/L 99Tcm-HYNIC-ASON组和500 nmol/L99Tcm-HYNIC-ASONM组MDM2mRNA含量分别为0.458±0.035、0.250±0.026、0.174±0.032、0.463±0.033,除0 nmol/L 99Tcm-HYNIC-ASON组与500 nmol/L99Tcm-HYNIC-ASONM组间外,余差异均有统计学意义(F=33.69,q=24.32~ 91.45,均P<0.01);各组MDM2蛋白的平均密度分别为90.712±3.042、71.218±2.915、32.775±3.062、88.121±2.710,同样除0 nmol/L 99Tcm-HYNIC-A