目的探讨bcl-2表达上调对人小细胞肺癌(SCLC)多药耐药的影响及相关机制.方法通过定向克隆方法,构建bcl-2正义RNA真核表达载体pLXSN-bcl-2;同时,体外合成bcl-2反义硫代磷酸寡核苷酸(AS-PS-ODNs),然后采用脂质体分别将其转染至人SCLC H446细胞及H446/DDP细胞,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测转染细胞中bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平;流式细胞仪DNA倍性分析观察顺铂(DDP)诱导转染细胞凋亡情况.转染时细胞分3组,pLXSN-bcl-2转染组[或bcl-2 AS-PS-ODNs转染组(AS-PS-ODNs转染组)]、pLXSN转染组[或bcl-2无义硫代磷酸寡核苷酸转染组(NS-PS-ODNs转染组)]和对照组(H446细胞组、H446/DDP细胞组).结果 (1)Western blot检测结果表明,对照H446细胞组、pLXSN转染组、pLXSN-bcl-2转染组间Bcl-2蛋白表达水平差异有统计学意义(F=11 221,P<0.05).转染pLXSN-bcl-2的H446细胞强表达Bcl-2蛋白(灰度值0.854±0.016),与对照H446细胞组(灰度值为0.103±0.005)相比差异有统计学意义(t=2.45,P<0.01);NS-PS-ODNs转染组的H446/DDP细胞,AS-PS-ODNs转染组的H446/DDP细胞,对照H446/DDP细胞组间Bcl-2蛋白表达水平差异有统计学意义(F=11 028,P<0.01).转染bcl-2 AS-PS-ODNs的H446/DDP细胞表达Bcl-2蛋白水平(灰度值为0.695

作者：戢福云；钱桂生；钱频；陈琰；郭芮伶；李淑萍；黄桂君

来源：中华结核和呼吸杂志 2006 年 29卷 3期